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技术Q&A

我可以用Scepter来数Milliplex微珠么?

是的。如果老师使用40um的Senser,Scepter可以用来给微珠计数。在计数前,请将微珠稀释到1X的浓度。

若实验结束后,无法立即在机子上面读板,我这个时候应该怎么做呢?

我们一般建议在实验结束后立即进行上机读板。但是如果由于各种原因延误读板,请将板子用Sealer封好,再用铝箔纸避光包裹,可以在2-8C保存24个小时。在读板之前,需要将板子放在Shaker上面振荡10分钟。请注意,延误读板可能会降低一些因子的检测灵敏度。

我发现有些试剂盒要求用Washing buffer预润湿膜孔,有些试剂盒要求用Assay buffer,不同的溶液润湿结果不同么?还是两者效果相同?我可以互换使用么?

用什么溶液润湿膜板取决于不同的试剂盒。两种溶液的成分不同,根据研发时的测试结果,不同的溶液对特定试剂盒的润湿封闭效果不同,所以,为了能更好地完成实验、获取准确的数据,请认真阅读每一个试剂盒的操作说明书,严格按照说明书进行操作,不要根据自己的经验或记忆来操作。

用Assay buffer或者Beads diluent稀释beads,有什么差别?为什么有的试剂盒用Assay buffer,有时候用Beads diluent。

事实上,Bead Diluent和Assay buffer都可以用于稀释beads。但是beads diluent中含有某些成分,与某些试剂盒中的beads中所含的成分相同,这样,beads diluent会更加适合用于微珠稀释。在检测insulin的时候,请务必使用beads diluent来稀释微珠。

请问你们的滤膜板/磁珠板是否要一次全部使用?如果不是,我该怎样操作?对于已经使用过的板子,可以保存多久?

你可以用粘膜(Sealer)将不用的孔封上,并在整个实验操作中时仍保持密封。已经使用的滤膜板/磁珠板没有保存时间的限制,您可以将其保存至您要使用的时候。

试剂盒的保质期是多久?重悬的试剂该如何保存?

我们所有的Milliplex的试剂盒都有至少三个月的保质期。试剂盒的过期日期标记在每个试剂盒上,它由试剂盒中效期最短的试剂保质期决定的。标准品、质控品、以及血清基质重悬后,建议分装保存在-20C,最多保存一个月。

请推荐兼容的蛋白酶抑制剂?

请参考如下产品: Protease Inhibitor Cocktail: Millipore Cat# 20-201; Aprotinin: Millipore Cat# 616370 (冻干) 或 616399 (直接使用); DPPIV Inhibitor: Millipore Cat# DPP4 或DPP4-010; AEBSF: Millipore Cat# 101500;

我的样品溶血了,会对后续实造成什么影响么?

溶血会导致蛋白水解酶从细胞中释放出来;其次,血红蛋白(>10mg/ml)被认为会干扰抗原抗体的结合。所以,轻微溶血的样品如果加入蛋白酶抑制剂后,还可以继续使用,但是重度溶血将会干扰后续实验。